復(fù)合酶法提取茯苓多糖反應(yīng)條件溫和,通過(guò) 裂解茯苓細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)而促進(jìn)茯苓多糖的溶出,提 高了其多糖提取率。 利用高速振動(dòng)和空化效應(yīng), 超聲提取法既提高了多糖提取率,又縮短了提取 時(shí)間。 綜上,筆者結(jié)合復(fù)合酶法和超聲提取法的 優(yōu)勢(shì),開(kāi)展超聲輔助酶法提取茯苓多糖的研究。 但由于該提取法在提取中易受復(fù)合酶種類(lèi)、比例、 活性和提取條件等因素的影響,導(dǎo)致茯苓多糖提 取率穩(wěn)定性和重復(fù)性較差。FA1204 電子天平(上海皓莊儀器有限公司); KQ-100DB 超聲波清洗器(昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限 公司);Specord 50 plus 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(德國(guó) 耶拿分析儀器股份公司);SHZ-DⅢ循環(huán)水真空泵 (鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司); SX-610 筆式 pH 計(jì)(上海三信儀表廠)。

    綜合纖維素酶和木瓜蛋白酶的最適溫度,選擇超 聲輔助酶法提取溫度為 55℃ 。 根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié) 果,發(fā)現(xiàn) pH、料液比和復(fù)合酶添加量三個(gè)因素對(duì) 茯苓多糖提取率的影響最大。 單因素結(jié)果表明: pH 為 5,料液比為 1 ∶ 50,復(fù)合酶添加量為 8%時(shí) 茯苓多糖提取率最高,以此為中心點(diǎn),以茯苓多糖 提取率為響應(yīng)值,采用 Design Expert 8. 0. 6 軟件設(shè) 計(jì) 3 因素 3 水平響應(yīng)面分析共 17 次試驗(yàn),中心點(diǎn) 重復(fù) 5 次試驗(yàn) 。在此條件下,其提取率為 7. 47 ± 0. 07%。 其原因?yàn)槔w維素酶可降解細(xì)胞壁中的纖 維素和非特異性裂解細(xì)胞壁中的幾丁質(zhì);木瓜蛋 白酶也可非特異性裂解細(xì)胞壁中的幾丁質(zhì),并通 過(guò)降解蛋白質(zhì)而將多糖和蛋白質(zhì)分離。