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鞏義予華

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體外抗氧化活性分析?。?!

返回列表 來(lái)源:未知 發(fā)布日期:2021-01-26 08:58【

材料與方法


電熱鼓風(fēng)干燥箱(DHG-9075A)、電熱恒溫水浴鍋 (HWS-24):上海一恒科學(xué)儀器有限公司;電子天平 (AUX320):日本島津公司;超聲波清洗器(KQ-500V): 昆山市超聲儀器有限公司;低速離心機(jī)(TD-6):長(zhǎng)沙 湘智離心機(jī)儀器有限公司;循環(huán)水式真空泵[SHZ-D (Ⅲ)]、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(YRE-5299):鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司;恒溫培養(yǎng)振蕩器(HNY-200B):天津市歐諾 儀器儀表有限公司。采用 FRAP 法按照 T-AOC 試劑盒說(shuō)明書檢測(cè)總抗 氧化能力,分別取濃度為 0.15、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5 mmol/L 的FeSO·4 7H2O 標(biāo)準(zhǔn)溶液 5 μL,各加入 180 μL FRAP 工 作液,混勻后 37 ℃孵育 4 min,測(cè)定其 OD593 nm。以 FeSO4 濃度(μmol/L)為橫坐標(biāo),OD593 nm 為縱坐標(biāo),繪制 FRAP 測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線[18]。根據(jù)測(cè)得的楊桃多酚提取液質(zhì)量濃 度,將其稀釋為 10、20、30、40、50、60 μg/mL,同時(shí)以等 濃度的抗壞血酸作陽(yáng)性對(duì)照。用移液器取 5 μL 溶液, 加入 FRAP 工作液 180 μL,混勻后 37 ℃孵育 4 min,測(cè) 定其 OD593 nm。

鞏義予華YRE-5299型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器


結(jié)果與分析


采用沒(méi)食子酸作為總多酚測(cè)定的標(biāo) 準(zhǔn)物質(zhì)時(shí),其在 765 nm 處的吸光度 OD765 nm 與其濃度 呈良好的線性關(guān)系。測(cè)定楊桃多酚提取液的吸光度 值,根據(jù)以上沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程,可得楊 桃多酚提取液的濃度為 5.2 mg/mL。后續(xù)總抗氧化能 力、羥自由基清除能力及 DPPH 自由基清除能力試驗(yàn) 中所使用的楊桃多酚提取液均是以此濃度楊桃多酚 提取液稀釋一定倍數(shù)得到的溶液。當(dāng)體積為 1.5 mL 時(shí)抗壞血酸對(duì)羥自由基的清除率達(dá) 99%以上,羥自由 基基本已被清除。在研究的體積范圍內(nèi),隨著楊桃多 酚提取液體積的增加,羥自由基清除率逐漸增加,最 高可達(dá) 90%以上,說(shuō)明楊桃多酚提取液有良好的自由 基清除能力。此外,同一質(zhì)量濃度條件下,楊桃多酚提 取液清除羥自由基的能力均低于相同濃度的抗壞血 酸溶液。