1 材料
1. 1 試劑與藥物
山藥皮由太原工業(yè)學(xué)院餐廳提供,烘干
粉碎后過 60 目篩,干燥保存?zhèn)溆?。硫酸銨、無水碳酸鈉、
無水乙醇、福林酚試劑均為分析純,購自國藥集團(tuán)化學(xué)試
劑有限公司; 沒食子酸對照品購自成都曼思特生物科技有限公司。
1. 2 儀器
XH-2008DE 超聲波萃取儀 ( 北京祥鵠科技發(fā)
展有限公司) ; RE-52B 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 ( 上海亞榮生化儀器
廠) ; SHZ-DⅢ循環(huán)水式真空泵 ( 鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司) ; TY-800 中藥多功能粉碎機(jī) ( 永康市敏業(yè)工貿(mào)有限
公司) ; DHG-9101 干燥箱 ( 金壇市榮華儀器制造有限公
司) ; 723N 可 見 分 光 光 度 計(jì) ( 上海精密科學(xué)儀器有限公司) 。
2 方法
采用福林酚法測定總多酚含有 量。吸取 1. 50 g /L 沒食子酸對照品溶液 0、0. 5、1. 0、 1. 5、2. 0、2. 5 mL,蒸餾水分別稀釋成 0、75、150、225、 300、375 mg /L,分 別 移 取 1 mL 至 10 mL 量 瓶 中,加 入 0. 1 mol /mL福林酚試劑 1 mL,搖勻,靜置 5 min,再加入7. 5% Na2CO3 溶液 5 mL,蒸餾水定容至刻度,室溫下避光 放置 2 h,以空白試劑為對照,在 765 nm 波長處測定吸光 度。以吸光度 ( A) 對沒食子酸質(zhì)量濃度 ( X) 進(jìn)行回歸, 得方 程 為 A = 0. 017 2X + 0. 019 8 ( R2 = 0. 998) ,在 0 ~ 45. 000 μg /mL 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。
3 結(jié)果
固 定 硫 酸 銨 質(zhì) 量 濃 度 為 0. 3 g /mL,考察與其成穩(wěn)定雙水相的乙醇體積分?jǐn)?shù) 30%、 40%、50%對總多酚得率的影響。由此可知, 當(dāng)乙 醇 體 積 分 數(shù) 為 30% 時(shí),總多酚得率較低,僅 為 1. 5 mg /g; 隨著其體積分?jǐn)?shù)升高,可與硫酸銨形成良好的 雙水相體 系,而且上相體積加大時(shí)得率升高,在 40%、 50%時(shí)接近 3. 8 mg /g,同時(shí)后者略有下降??紤]到溶劑消 耗量和提取率,確定乙醇體積分?jǐn)?shù)為 40%。
4 結(jié)論
采用超聲波輔助乙醇-硫酸銨雙水相體系提取山 藥皮總多酚,再采用單因素試驗(yàn)考察各因素對其得率的影 響趨勢,確定雙水相體系乙醇體積分?jǐn)?shù)為 40%,超聲時(shí)間 為 20 min。在此基礎(chǔ)上,通過響應(yīng)面法發(fā)現(xiàn)各因素影響程度依次為液料比>硫酸銨質(zhì)量濃度>超聲功率,最優(yōu)工藝為 乙醇體積分?jǐn)?shù) 40%,硫酸銨質(zhì)量濃度 0. 27 g /mL,液料比 28 ∶ 1,超聲功率 605 W,超聲時(shí)間 20 min,總多酚得率為 4. 147 mg /g,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 57%,與超高壓輔助提取所得結(jié) 果相當(dāng)。
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