1 材料與方法
1.1 材料
18 日齡健康昆明小鼠 88 只,體質(zhì)量 約 20 g,雌雄各半,購(gòu)自湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公 司,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物號(hào):No.43004700051479。珠蓼散(由山蒼子、辣蓼、鐵莧菜組成) 各藥材均采自長(zhǎng)沙市望城區(qū),經(jīng)湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)藥學(xué)實(shí)驗(yàn)室鑒定合格。番瀉葉(批號(hào) 18070604)、大黃(批號(hào)18123006)、 蒙脫石散(批號(hào) 180409),購(gòu)自養(yǎng)天和大藥房農(nóng)大店。大腸桿菌、沙門菌由湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)微 生物實(shí)驗(yàn)室提供。
1.2 儀器設(shè)備
YRE-2000A 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司;BG28MEK-6318 型電子天平,北京電西遠(yuǎn)大科技 有限公司;剪刀、鑷 6 子、灌胃針等器械。
1.3 方法
將山蒼子、鐵莧菜、辣蓼 三種中藥粗粉按 1∶1∶1 配方,采用煮沸提取法制成復(fù)方濃縮 液,然后用超純水分別稀釋成濃度為 2.00 g/mL、1.00 g/mL、 0.50 g/mL、0.25 g/mL 的珠蓼散水提液。其中預(yù)防試驗(yàn)高、 中、低劑量分別為 1.00 g/mL、0.50 g/mL、0.25 g/mL;治療 試驗(yàn)高、中、低劑量分別為 2.00 g/mL、1.00 g/mL、0.50 g/mL。取番瀉葉加水浸泡 30 min, 煮沸約 10 min,過濾袋過濾后,將濾液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮 成 1∶1 水提液。按照小鼠體重每 10 g 灌胃 0.2 mL/次,2 次/ d,連續(xù) 3 d,當(dāng)模型小鼠與正常小鼠相比,腹瀉率與腹瀉 指數(shù)有顯著差異時(shí),即造模成功。
2 結(jié)果
在給番瀉葉后 6 h,試驗(yàn) I、II、III 組較對(duì)照 V 組的腹 瀉腹瀉指數(shù)均有下降,經(jīng) t 檢驗(yàn),有顯著差異(0.01<P≤ 0.05),表明珠蓼散對(duì)預(yù)防小鼠腹瀉有顯著效果。以市面上常見的治療腹瀉藥物蒙脫石散作為對(duì)照藥 物。在給番瀉葉后 6 h,將試驗(yàn) III、IV 組與對(duì)照 V 組比較,發(fā) 現(xiàn)試驗(yàn) III、IV 組的腹瀉指數(shù)均低于對(duì)照 V 組,經(jīng) t 檢驗(yàn),有 顯著差異(0.01<P≤0.05),表明珠蓼散與蒙脫石散均有預(yù)防 小鼠腹瀉的作用。但試驗(yàn) III 組較試驗(yàn) IV 組的腹瀉指數(shù)明 顯降低,表明珠蓼散對(duì)小鼠腹瀉的預(yù)防效果更佳。腹瀉小鼠治療后 6h,試驗(yàn) A、B、C 組較空白 E 組在的 腹瀉指數(shù)上明顯降低,但經(jīng) t 檢驗(yàn),C 組與 E 組差異顯著 (0.01<P≤0.05),而 A、B 組與 E 組差異不顯著(P>0.05), 表明試驗(yàn) C 組治療效果優(yōu)于 A、B 組,珠蓼散高劑量對(duì)小 鼠腹瀉有顯著的治療效果。
3 討論
小鼠腹瀉模型試驗(yàn)得出中藥番瀉葉效果最佳,其原因應(yīng) 與番瀉葉成分有關(guān),在番瀉葉成分中大部分為結(jié)合型蒽醌, 不經(jīng)小腸吸收,直接進(jìn)入大腸,在腸內(nèi)多種細(xì)菌(酶)的作用 下,通過還原、水解等不同途徑代謝成為大黃酸蒽酮及其衍 生物,一方面這些成分可阻止 Na+和葡萄糖的跨腸壁轉(zhuǎn)運(yùn), 抑制 Na+ -K+ -ATP 酶活性,增加腸腔內(nèi)容積繼而刺激腸壁反 射,使小腸和結(jié)腸蠕動(dòng)增強(qiáng);另一方面刺激腸粘膜釋放前列 腺素(PG),在保護(hù)腸黏膜的同時(shí),炎性介質(zhì)導(dǎo)致腸上皮細(xì)胞 通透性增加等引發(fā)腹瀉[6]。因而采取中藥番瀉葉造模,在達(dá)到 最優(yōu)效果的同時(shí),又有著低殘留,安全性高等優(yōu)點(diǎn)。
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